Azokazein

From Wiki FKKT
Revision as of 18:41, 4 January 2010 by Kemijaaa (talk | contribs) (New page: Je nespecifičen substrat za različne endopeptidaze, to je encimov, ki cepijo nekočne peptidne vezi beljakovin, zato jih imenujemo tudi endoproteaze. Pripravlja se z obarvanjem kazeina o...)
(diff) ← Older revision | Latest revision (diff) | Newer revision → (diff)
Jump to navigationJump to search

Je nespecifičen substrat za različne endopeptidaze, to je encimov, ki cepijo nekočne peptidne vezi beljakovin, zato jih imenujemo tudi endoproteaze. Pripravlja se z obarvanjem kazeina ob dodatku sulfanilne kisline. S hidrolizo kazeina sprostimo azo obarvanje v medij, kjer je zaznan z absorbanco pri 440 nm. Azokazein je derivat naravnega proteina kazeina (produkta kravje mlečne žleze), pri katerem so stranske verige tirozina in histidina povezane s sulfanilamidom v alkalnem, z dvojno dušikovo vezjo. Takšna vezava daje omenjenemu proteinu intenzivno rumeno barvo. Uporablja se ga za kvantitativno merjenje proteazne encimske aktivnosti , pri kateri ga uporabimo kot substrat. Intenziteta barve dosežena pri poskusu je sorazmerna razgrajenemu azokazeinu v vzorcu, ta pa proteolitični aktivnosti vzorca. Koncentracija razgrajenega azokazeina je posledica delovanja encimov v vzorcu. Azo Kazein je lahko uporabljen za test vseh endopeptidaz ( kot tudi bakterijskih bazičnih proteaz, tripsina, bromelaina), ki delujejo na kazein. Je tudi vnetni povzročitelj amiloidoze amiloida A ( tj. kopičenje fibril beljakovine amiloid A v organih v telesu ) pri poskusih z živalmi.