https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&feed=atom&action=history
Kloniranje miši iz iPSC - Revision history
2024-03-29T02:08:54Z
Revision history for this page on the wiki
MediaWiki 1.39.3
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8201&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-06-04T22:25:00Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 22:25, 4 June 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l31">Line 31:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 31:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4, ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, utišanje njegovega gena pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4, ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, utišanje njegovega gena pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Anti - </del>SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div> </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div> </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8198&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (2. primer) */
2013-06-03T15:35:14Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (2. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 15:35, 3 June 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l59">Line 59:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 59:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">bisulfidne metilacije </del>je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog, </del>vzorec <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">katere je bil zelo podoben demetilaciji </del>kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se je močno razlikoval od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">z bisulfidnim skevenciranjem </ins>je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">podoben metilacijski vzorec kot </ins>vzorec kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se je močno razlikoval od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Pluripotentnost teh linij so dokazali tudi z vnosom le teh v miši s hudo kombinirano imunsko pomanjkljivostjo pri katerih se je razvil teratom z vsemi tremi zarodnimi plastmi. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Pluripotentnost teh linij so dokazali tudi z vnosom le teh v miši s hudo kombinirano imunsko pomanjkljivostjo pri katerih se je razvil teratom z vsemi tremi zarodnimi plastmi. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8180&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (2. primer) */
2013-05-28T08:20:05Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (2. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 08:20, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l63">Line 63:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 63:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Za nadaljnjo testiranje pluripotentnosti so naključno izbrali celične linije ter jih vključili v normalno CD-1 blastocisto ter jo prenesli v CD-1 samico miši, ter opazovali razvoj embriov do mladičev.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Za nadaljnjo testiranje pluripotentnosti so naključno izbrali celične linije ter jih vključili v normalno CD-1 blastocisto ter jo prenesli v CD-1 samico miši, ter opazovali razvoj embriov do mladičev.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Rezultati so pokazali da celične linije IP36D in IP20D razvijejo žive <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">miški </del>z 5-80% himernostjo, linije IP14D pa miši z 10-95% himernostjo. </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Rezultati so pokazali da celične linije IP36D in IP20D razvijejo žive <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">miši </ins>z 5-80% himernostjo, linije IP14D pa miši z 10-95% himernostjo. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Kloniranje miši s tetraploidno komplementacijo ni bilo enako uspešno pri vseh celičnih linijah, iz celičnih linij IP36D so se sicer razvili embrii, ki pa so v 10. dnevu razvoja umrli. Celične linije IP20D prav tako niso razvile živih mladičev oz. embriov starejših od 17 dni, med tem ko se je iz celičnih linij IP14D razvilo tudi do 22 živih mladičev. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Kloniranje miši s tetraploidno komplementacijo ni bilo enako uspešno pri vseh celičnih linijah, iz celičnih linij IP36D so se sicer razvili embrii, ki pa so v 10. dnevu razvoja umrli. Celične linije IP20D prav tako niso razvile živih mladičev oz. embriov starejših od 17 dni, med tem ko se je iz celičnih linij IP14D razvilo tudi do 22 živih mladičev. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Rezultati celične linije IP14D-1 so bili celo primerljivi z rezultati kontrolne skupine z embrionalnimi celicami (v obeh primerih se je razvilo približno 3% živih mladičev).</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Rezultati celične linije IP14D-1 so bili celo primerljivi z rezultati kontrolne skupine z embrionalnimi celicami (v obeh primerih se je razvilo približno 3% živih mladičev).</div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8179&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (2. primer) */
2013-05-28T07:14:19Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (2. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 07:14, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l57">Line 57:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 57:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na gojiščih na katerih so gojili mišje embrionalne fibroblaste, v katere so prenesli "Yamanaka faktorje", so po 10 dneh zaznali večjo količino alkalne fosfataze, katere povišana količina se pojavlja v membrani pluripotentih celic ter med drugim služi kot test pluripotentonost. Prav tako so zaznali zeleni fluorescirajoči protein (GPF), ki je kazal na prisotnost Oct4 (katerega količina upade ob začetku diferenciacije celic).</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na gojiščih na katerih so gojili mišje embrionalne fibroblaste, v katere so prenesli "Yamanaka faktorje", so po 10 dneh zaznali večjo količino alkalne fosfataze, katere povišana količina se pojavlja v membrani pluripotentih celic ter med drugim služi kot test pluripotentonost. Prav tako so zaznali zeleni fluorescirajoči protein (GPF), ki je kazal na prisotnost Oct4 (katerega količina upade ob začetku diferenciacije celic).</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">celičnih linij</del>, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test bisulfidne metilacije je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog, vzorec katere je bil zelo podoben demetilaciji kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se je močno razlikoval od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test bisulfidne metilacije je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog, vzorec katere je bil zelo podoben demetilaciji kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se je močno razlikoval od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8178&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (2. primer) */
2013-05-28T07:13:42Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (2. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 07:13, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l55">Line 55:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 55:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (2. primer)===</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (2. primer)===</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na gojiščih na katerih so gojili mišje embrionalne fibroblaste, v katere so prenesli Yamanaka faktorje, so po 10 dneh zaznali večjo količino alkalne fosfataze, katere povišana količina se pojavlja v membrani pluripotentih celic ter med drugim služi kot test pluripotentonost. Prav tako so zaznali zeleni fluorescirajoči protein (GPF), ki je kazal na prisotnost Oct4 (katerega količina upade ob začetku diferenciacije celic).</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na gojiščih na katerih so gojili mišje embrionalne fibroblaste, v katere so prenesli <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">"</ins>Yamanaka faktorje<ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">"</ins>, so po 10 dneh zaznali večjo količino alkalne fosfataze, katere povišana količina se pojavlja v membrani pluripotentih celic ter med drugim služi kot test pluripotentonost. Prav tako so zaznali zeleni fluorescirajoči protein (GPF), ki je kazal na prisotnost Oct4 (katerega količina upade ob začetku diferenciacije celic).</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih celičnih linij, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Celice so iz gojišča odvzeli po 14 dneh, (celične linije IP14D), 20 dneh (celične linije IP20D) in 36 dneh (celične linije IP36D) ter na tak način pridobili 31 stabilnih celičnih linij, diploentnih celičnih linij s 40 kromosomi.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test bisulfidne metilacije je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">ki </del>je zelo <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">podobna </del>demetilaciji kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se močno <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">razlikuje </del>od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Test bisulfidne metilacije je v treh od pridobljenih celičnih linij (IP20D-3, IP36D-3 ter IP14D-1) pokazal demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog, <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">vzorec katere </ins>je <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">bil </ins>zelo <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">podoben </ins>demetilaciji kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa se <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">je </ins>močno <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">razlikoval </ins>od mišjih embrionalnih fibroblastov, iz katerih so z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene pluripotentne celične linije. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Pluripotentnost teh linij so dokazali tudi z vnosom le teh v miši s hudo kombinirano imunsko pomanjkljivostjo pri katerih se je razvil teratom z vsemi tremi zarodnimi plastmi. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Pluripotentnost teh linij so dokazali tudi z vnosom le teh v miši s hudo kombinirano imunsko pomanjkljivostjo pri katerih se je razvil teratom z vsemi tremi zarodnimi plastmi. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8177&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-05-28T07:10:45Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 07:10, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l20">Line 20:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 20:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (1. primer)===</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (1. primer)===</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Z reprogramiranjem Pcdh21/cre-Z/EG fibroblastov se je po 5 dneh v prisotnosti <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">dox </del>in VPA <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">in </del>7 dneh le v prisotnosti <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">dox </del>razvilo 21 celičnih linij, označenih z oznakami iMZ1-21.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Z reprogramiranjem Pcdh21/cre-Z/EG fibroblastov se je po 5 dneh v prisotnosti <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">doksiciklina </ins>in VPA <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">ter po </ins>7 dneh le v prisotnosti <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">doksiciklina </ins>razvilo 21 celičnih linij, označenih z oznakami iMZ1-21.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Ker univerzalnega testa za ugotavljanje pluripotetnosti še ni, so izvedli vrsto testiranj, na podlagi katerih so izbrali celične linije primerne za test tetraploidne komplementacije. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Ker univerzalnega testa za ugotavljanje pluripotetnosti še ni, so izvedli vrsto testiranj, na podlagi katerih so izbrali celične linije primerne za test tetraploidne komplementacije. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Glede na morfologijo oz. nenormalno širjenje so zavrgli 9 celičnih linij, ostalih <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">5 </del>pa testirali z imonofluorescenco za ekspresijo markerjev za pluripotentnost (Sox2, Oct4). </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Glede na morfologijo oz. nenormalno širjenje so zavrgli 9 celičnih linij, ostalih <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">15 </ins>pa testirali z imonofluorescenco za ekspresijo markerjev za pluripotentnost (Sox2, Oct4). </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog<del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">: </del>transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog<ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">, ki je </ins>transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4<del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">: </del>ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">njegovo </del>utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4<ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">, </ins>ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, utišanje <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">njegovega gena </ins>pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah.</div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8176&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-05-28T01:32:33Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 01:32, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l31">Line 31:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 31:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4: ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, njegovo utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4: ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, njegovo utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah. </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah.</div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;"> </ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>4 od 7 celičnih linij so razvile veliko mišjih vohalnih nevronov (iMZ9, iMZ11, iMZ14, iMZ17 in iMZ21). To skupino ter skupino linij, ki so bile pozitivne na vse pluripotentne markerje, vendar so razvile relativno nizko število vohalnih nevronov so izbrali za nadaljnje analize kariotipa. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>4 od 7 celičnih linij so razvile veliko mišjih vohalnih nevronov (iMZ9, iMZ11, iMZ14, iMZ17 in iMZ21). To skupino ter skupino linij, ki so bile pozitivne na vse pluripotentne markerje, vendar so razvile relativno nizko število vohalnih nevronov so izbrali za nadaljnje analize kariotipa. </div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8175&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-05-28T01:32:08Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 01:32, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l26">Line 26:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 26:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;"></ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog: transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog: transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;"></ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4: ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, njegovo utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Oct4: ta transkripcijski faktor je aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi v embriih. Pojavlja se tudi v nediferenciranih celicah tumorjev, njegovo utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;"></ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Anti - SSEA-1: ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA-1 gena močno poveča, antigene za SSEA-1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev ter njihovih rakavih celicah. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij, ki so se v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale od fibroblastov iz katerih so reprogramirali iPS celice. </div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8174&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-05-28T01:31:11Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 01:31, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l24">Line 24:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 24:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Glede na morfologijo oz. nenormalno širjenje so zavrgli 9 celičnih linij, ostalih 5 pa testirali z imonofluorescenco za ekspresijo markerjev za pluripotentnost (Sox2, Oct4). </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Glede na morfologijo oz. nenormalno širjenje so zavrgli 9 celičnih linij, ostalih 5 pa testirali z imonofluorescenco za ekspresijo markerjev za pluripotentnost (Sox2, Oct4). </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">(ob testiranju z imunofluorescenco, so zaradi proteina GFP s katerim so testirali izražanje Oct4, linije fluorescirale močno zeleno) </del>ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so se iz vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste, ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 in iMZ21 ter skupino celičnih linij, ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih celic z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog: transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>Nanog: transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </div></td></tr>
</table>
AnaGrom
https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php?title=Kloniranje_mi%C5%A1i_iz_iPSC&diff=8173&oldid=prev
AnaGrom: /* Pridobivanje celičnih linij (1. primer) */
2013-05-28T01:06:04Z
<p><span dir="auto"><span class="autocomment">Pridobivanje celičnih linij (1. primer)</span></span></p>
<table style="background-color: #fff; color: #202122;" data-mw="interface">
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<col class="diff-marker" />
<col class="diff-content" />
<tr class="diff-title" lang="en">
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">← Older revision</td>
<td colspan="2" style="background-color: #fff; color: #202122; text-align: center;">Revision as of 01:06, 28 May 2013</td>
</tr><tr><td colspan="2" class="diff-lineno" id="mw-diff-left-l20">Line 20:</td>
<td colspan="2" class="diff-lineno">Line 20:</td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (1. primer)===</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Pridobivanje celičnih linij (1. primer)===</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Na gojiščih na katerih so gojili celice</del>, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">v katere </del>so <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">prenesli Yamanaka faktoje</del>, so <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">po 10 dneh zaznali alkalno fosfatazo, katere povišana količina se pojavlja v membrani pluripotentih celic ter med drugim služi kot </del>test <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">pluripotentonosti</del>.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Z reprogramiranjem Pcdh21/cre-Z/EG fibroblastov se je po 5 dneh v prisotnosti dox in VPA in 7 dneh le v prisotnosti dox razvilo 21 celičnih linij, označenih z oznakami iMZ1-21.</ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Ker univerzalnega testa za ugotavljanje pluripotetnosti še ni</ins>, so <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">izvedli vrsto testiranj</ins>, <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">na podlagi katerih </ins>so <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">izbrali celične linije primerne za </ins>test <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">tetraploidne komplementacije</ins>. </div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Celice </del>se iz <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">gojišča odvzeli po 14</del>, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">20 </del>in <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">36 dneh </del>ter <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">na tak način pridobili 31 stabilnih </del>celičnih linij, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">diploentnih </del>celic <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">s 40 kromosomi.</del></div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Glede na morfologijo oz. nenormalno širjenje so zavrgli 9 celičnih linij, ostalih 5 pa testirali z imonofluorescenco za ekspresijo markerjev za pluripotentnost (Sox2, Oct4). </ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div> </div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Vse linije so vsebovale izražene markerje prav tako so </ins>se iz <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">vseh razvila embrionalna telesa, pri katerih so testirali sposobnost tvorbe mišjih vohalnih nevronov. Celične linije so razdelili v 2 skupini: tiste</ins>, <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">ki so razvile veliko število mišjih vohalnih nevronov: celične linije iMZ2, iMZ10, iMZ12, iMZ13, iMZ18, iMZ11, iMZ14, iMZ17, iMZ20 </ins>in <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">iMZ21 (ob testiranju z imunofluorescenco, so zaradi proteina GFP s katerim so testirali izražanje Oct4, linije fluorescirale močno zeleno) </ins>ter <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">skupino </ins>celičnih linij, <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">ki so razvile malo vohalnih nevronov: iMZ3, iMZ15, iMZ7, iMZ9.</ins></div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker" data-marker="−"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #ffe49c; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Test bisulfidne metilacije </del>je v <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">pridobljenih celičnih linijah je </del>v <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">3 celičnih linijah</del>: <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">IP20D</del>-<del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">3</del>, <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">IP36D</del>-<del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">3 </del>ter <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">IP14D-1 pokazal demetilacijo promotorjev Oct4 in Nanog</del>, ki <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">je zelo podobna demetilaciji kontrolne skupine embrionalnih celic, h krati pa </del>se <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">močno razlikuje </del>od <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">mišjih embrionalnih </del>fibroblastov<del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">, </del>iz katerih so <del style="font-weight: bold; text-decoration: none;">z reprogramiranjem pridobili zgoraj omenjene celične linije</del>.</div></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">V nadaljnjih testiranjih so linije primerjali s kontrolno skupino embrionalnih </ins>celic <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">z imunooznačevanjem treh pluripotentnih markerjev za:</ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Nanog: transkripcijski faktor za Rex1 promotor ter je ključnega pomena za ohranjanje pluripotentnosti (Rex1 je prav tako eden izmed markerjev za pluripotentnost, njegova količina močno upade ob začetku diferenciacije celic) </ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Oct4: ta transkripcijski faktor </ins>je <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">aktiven predvsem v oocitih, ostaja pa prisoten tudi </ins>v <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">embriih. Pojavlja se tudi </ins>v <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">nediferenciranih celicah tumorjev, njegovo utišanje pa pripelje do diferenciacije celic.</ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Anti - SSEA-1</ins>: <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">ob začetku diferenciacije celic se izražanje SSEA</ins>-<ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">1 gena močno poveča</ins>, <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">antigene za SSEA</ins>-<ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">1 oz. drugače imenovanemu tudi CD15 najdemo v zarodnih oz. embrionalnih celicah glodavcev </ins>ter <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">njihovih rakavih celicah. </ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Na podlagi teh markerjev so ugotavljali podrobnosti z embrionalnimi celicami ter izbrali 7 celičnih linij</ins>, ki <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">so </ins>se <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">v podobnosti ujemale z embrionalnimi celicami in posledično razlikovale </ins>od fibroblastov iz katerih so <ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">reprogramirali iPS celice. </ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">4 od 7 celičnih linij so razvile veliko mišjih vohalnih nevronov (iMZ9, iMZ11, iMZ14, iMZ17 in iMZ21). To skupino ter skupino linij, ki so bile pozitivne na vse pluripotentne markerje, vendar so razvile relativno nizko število vohalnih nevronov so izbrali za nadaljnje analize kariotipa. </ins></div></td></tr>
<tr><td colspan="2" class="diff-side-deleted"></td><td class="diff-marker" data-marker="+"></td><td style="color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #a3d3ff; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div><ins style="font-weight: bold; text-decoration: none;">Štiri od osmih linij so bile euploidne (iMZ9, iMZ11, iMZ15 in iMZ21) ter tako primerne za uporabo v testu tetraploidne komplementacije</ins>.</div></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><br/></td></tr>
<tr><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Celične in genetske analize (1. primer)===</div></td><td class="diff-marker"></td><td style="background-color: #f8f9fa; color: #202122; font-size: 88%; border-style: solid; border-width: 1px 1px 1px 4px; border-radius: 0.33em; border-color: #eaecf0; vertical-align: top; white-space: pre-wrap;"><div>===Celične in genetske analize (1. primer)===</div></td></tr>
</table>
AnaGrom