Molekularni inženiring funkcionalnih siRNA - Revision history

Nataša Vujović: /* BioRNA/BCL2-siRNA */

2025-05-19T19:48:21Z

BioRNA/BCL2-siRNA

← Older revision		Revision as of 19:48, 19 May 2025
Line 34:		Line 34:

	Nato so testirali konstrukt BioRNA/BCL2-siRNA in ga primerjali s kemično sintetizirano siRNA enakega zaporedja. BCL2 (''angl.'' B-cell lymphoma 2) je onkogen, ki rakavim celicam omogoča izogibanje apoptozi. Ker lahko utišanje gena BCL2 sproži apoptozo v tumorskih celicah, je le-ta pomembna terapevtska tarča pri zdravljenju raka.		Nato so testirali konstrukt BioRNA/BCL2-siRNA in ga primerjali s kemično sintetizirano siRNA enakega zaporedja. BCL2 (''angl.'' B-cell lymphoma 2) je onkogen, ki rakavim celicam omogoča izogibanje apoptozi. Ker lahko utišanje gena BCL2 sproži apoptozo v tumorskih celicah, je le-ta pomembna terapevtska tarča pri zdravljenju raka.
	Izvedli so transfekcijo človeških celic nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC) z BioRNA/BCL2-siRNA, s kemično sintetizirano siRNA BCL2 ter z ustreznimi kontrolami. Uporabili so RT-qPCR s oligonukleotidom steblo-zanka (''angl.'' stem-loop RT-qPCR), ki omogoča natančno pomnoževanje zrele oblike zaporedja siRNA proti BCL2. Po 48 urah po transfekciji so zaznali prisotnost zrele oblike siRNA proti BCL2 tako v celicah, transfeciranih z BioRNA/BCL2-siRNA kot s sintetično siRNA. Zanimivo je dejstvo, da so celice, transfecirane z BioRNA/BCL2-siRNA, pokazale bistveno višje ravni zrele siRNA kot celice, transfecirane s sintetično siRNA (pri enaki koncentraciji 15 nM). Ta rezultat nakazuje, da je biološko zasnovana RNA morda učinkoviteje sprejeta in stabilnejša od sintetične oblike. Po meritvi izražanja gena BCL2 po 48-72 urah, je BioRNA/siRNA pokazala enako ali večjo učinkovitost utišanja genov v primerjavi z običajnimi siRNA.		Izvedli so transfekcijo človeških celic nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC) z BioRNA/BCL2-siRNA, s kemično sintetizirano siRNA BCL2 ter z ustreznimi kontrolami. Uporabili so RT-qPCR z oligonukleotidom steblo-zanka (''angl.'' stem-loop RT-qPCR), ki omogoča natančno pomnoževanje zrele oblike zaporedja siRNA proti BCL2. Po 48 urah po transfekciji so zaznali prisotnost zrele oblike siRNA proti BCL2 tako v celicah, transfeciranih z BioRNA/BCL2-siRNA kot s sintetično siRNA. Zanimivo je dejstvo, da so celice, transfecirane z BioRNA/BCL2-siRNA, pokazale bistveno višje ravni zrele siRNA kot celice, transfecirane s sintetično siRNA (pri enaki koncentraciji 15 nM). Ta rezultat nakazuje, da je biološko zasnovana RNA morda učinkoviteje sprejeta in stabilnejša od sintetične oblike. Po meritvi izražanja gena BCL2 po 48-72 urah, je BioRNA/siRNA pokazala enako ali večjo učinkovitost utišanja genov v primerjavi z običajnimi siRNA.
	Obe siRNA sta učinkovito znižali raven BCL2 mRNA. Natančneje, BioRNA/BCL2-siRNA je v dveh celičnih linijah NSCLC zmanjšala raven BCL2 mRNA za približno 70-80 %, raven proteinov pa za 60-75 %, kar je bilo enako ali boljše od utišanja, doseženega s sintetično siRNA. Te ugotovitve nakazujejo na to, da biološko sintetizirana siRNA ne le učinkovito opravlja svojo funkcijo, temveč je sposobna celo preseči delovanje standardne sintetične siRNA. Razlog za povečano učinkovitost BioRNA v celici bi lahko ležal v ohranjenosti strukture pre-miRNA, kar bi encimu Dicer olajšalo prepoznavanje. Lahko pa gre tudi za odsotnost kemičnih modifikacij, ki lahko pri sintetičnih oblikah ovirajo nadaljnjo obdelavo [2].		Obe siRNA sta učinkovito znižali raven BCL2 mRNA. Natančneje, BioRNA/BCL2-siRNA je v dveh celičnih linijah NSCLC zmanjšala raven BCL2 mRNA za približno 70-80 %, raven proteinov pa za 60-75 %, kar je bilo enako ali boljše od utišanja, doseženega s sintetično siRNA. Te ugotovitve nakazujejo na to, da biološko sintetizirana siRNA ne le učinkovito opravlja svojo funkcijo, temveč je sposobna celo preseči delovanje standardne sintetične siRNA. Razlog za povečano učinkovitost BioRNA v celici bi lahko ležal v ohranjenosti strukture pre-miRNA, kar bi encimu Dicer olajšalo prepoznavanje. Lahko pa gre tudi za odsotnost kemičnih modifikacij, ki lahko pri sintetičnih oblikah ovirajo nadaljnjo obdelavo [2].

Nataša Vujović at 19:46, 19 May 2025

2025-05-19T19:46:59Z

← Older revision		Revision as of 19:46, 19 May 2025
Line 34:		Line 34:

	Nato so testirali konstrukt BioRNA/BCL2-siRNA in ga primerjali s kemično sintetizirano siRNA enakega zaporedja. BCL2 (''angl.'' B-cell lymphoma 2) je onkogen, ki rakavim celicam omogoča izogibanje apoptozi. Ker lahko utišanje gena BCL2 sproži apoptozo v tumorskih celicah, je le-ta pomembna terapevtska tarča pri zdravljenju raka.		Nato so testirali konstrukt BioRNA/BCL2-siRNA in ga primerjali s kemično sintetizirano siRNA enakega zaporedja. BCL2 (''angl.'' B-cell lymphoma 2) je onkogen, ki rakavim celicam omogoča izogibanje apoptozi. Ker lahko utišanje gena BCL2 sproži apoptozo v tumorskih celicah, je le-ta pomembna terapevtska tarča pri zdravljenju raka.
	Izvedli so transfekcijo človeških celic nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC) z BioRNA/BCL2-siRNA, s kemično sintetizirano siRNA BCL2 ter z ustreznimi kontrolami. Uporabili so RT-qPCR ~~z lasnično zanko~~ (''angl.'' stem-loop RT-qPCR), ki omogoča natančno pomnoževanje zrele oblike zaporedja siRNA proti BCL2. Po 48 urah po transfekciji so zaznali prisotnost zrele oblike siRNA proti BCL2 tako v celicah, transfeciranih z BioRNA/BCL2-siRNA kot s sintetično siRNA. Zanimivo je dejstvo, da so celice, transfecirane z BioRNA/BCL2-siRNA, pokazale bistveno višje ravni zrele siRNA kot celice, transfecirane s sintetično siRNA (pri enaki koncentraciji 15 nM). Ta rezultat nakazuje, da je biološko zasnovana RNA morda učinkoviteje sprejeta in stabilnejša od sintetične oblike. Po meritvi izražanja gena BCL2 po 48-72 urah, je BioRNA/siRNA pokazala enako ali večjo učinkovitost utišanja genov v primerjavi z običajnimi siRNA.		Izvedli so transfekcijo človeških celic nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC) z BioRNA/BCL2-siRNA, s kemično sintetizirano siRNA BCL2 ter z ustreznimi kontrolami. Uporabili so RT-qPCR s oligonukleotidom steblo-zanka (''angl.'' stem-loop RT-qPCR), ki omogoča natančno pomnoževanje zrele oblike zaporedja siRNA proti BCL2. Po 48 urah po transfekciji so zaznali prisotnost zrele oblike siRNA proti BCL2 tako v celicah, transfeciranih z BioRNA/BCL2-siRNA kot s sintetično siRNA. Zanimivo je dejstvo, da so celice, transfecirane z BioRNA/BCL2-siRNA, pokazale bistveno višje ravni zrele siRNA kot celice, transfecirane s sintetično siRNA (pri enaki koncentraciji 15 nM). Ta rezultat nakazuje, da je biološko zasnovana RNA morda učinkoviteje sprejeta in stabilnejša od sintetične oblike. Po meritvi izražanja gena BCL2 po 48-72 urah, je BioRNA/siRNA pokazala enako ali večjo učinkovitost utišanja genov v primerjavi z običajnimi siRNA.
	Obe siRNA sta učinkovito znižali raven BCL2 mRNA. Natančneje, BioRNA/BCL2-siRNA je v dveh celičnih linijah NSCLC zmanjšala raven BCL2 mRNA za približno 70-80 %, raven proteinov pa za 60-75 %, kar je bilo enako ali boljše od utišanja, doseženega s sintetično siRNA. Te ugotovitve nakazujejo na to, da biološko sintetizirana siRNA ne le učinkovito opravlja svojo funkcijo, temveč je sposobna celo preseči delovanje standardne sintetične siRNA. Razlog za povečano učinkovitost BioRNA v celici bi lahko ležal v ohranjenosti strukture pre-miRNA, kar bi encimu Dicer olajšalo prepoznavanje. Lahko pa gre tudi za odsotnost kemičnih modifikacij, ki lahko pri sintetičnih oblikah ovirajo nadaljnjo obdelavo [2].		Obe siRNA sta učinkovito znižali raven BCL2 mRNA. Natančneje, BioRNA/BCL2-siRNA je v dveh celičnih linijah NSCLC zmanjšala raven BCL2 mRNA za približno 70-80 %, raven proteinov pa za 60-75 %, kar je bilo enako ali boljše od utišanja, doseženega s sintetično siRNA. Te ugotovitve nakazujejo na to, da biološko sintetizirana siRNA ne le učinkovito opravlja svojo funkcijo, temveč je sposobna celo preseči delovanje standardne sintetične siRNA. Razlog za povečano učinkovitost BioRNA v celici bi lahko ležal v ohranjenosti strukture pre-miRNA, kar bi encimu Dicer olajšalo prepoznavanje. Lahko pa gre tudi za odsotnost kemičnih modifikacij, ki lahko pri sintetičnih oblikah ovirajo nadaljnjo obdelavo [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:22:26Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:22, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost ~~odražavata~~ naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost odražavajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:21:30Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:21, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost ~~odražata~~ naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost odražavata naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:21:11Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:21, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost ~~odražajo~~ naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost odražata naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:19:47Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:19, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti, biološka aktivnost ~~in varnostni profili~~ odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti in biološka aktivnost odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:15:21Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:15, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA~~, izraženega z bakterijsko fermentacijo~~, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti, biološka aktivnost in varnostni profili odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti, biološka aktivnost in varnostni profili odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* Zaključek */

2025-05-19T19:11:11Z

Zaključek

← Older revision		Revision as of 19:11, 19 May 2025
Line 44:		Line 44:

	== Zaključek ==		== Zaključek ==
	Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in ~~se spogleduje z zdravljenjem~~ prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, izraženega z bakterijsko fermentacijo, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti, biološka aktivnost in varnostni profili odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.		Prihodnost terapija z RNAi je obetavna in odpira nove možnosti za zdravljenje prej neozdravljivih bolezni, vključno z genetskimi motnjami, boleznimi srca in ožilja, rakom, sladkorno boleznijo in virusnimi okužbami. Nedavne odobritve s strani FDA in številne klinične študije poudarjajo njen naraščajoči terapevtski potencial. Batra in sod. so so v raziskavi uspešno uporabili inovativen bioinženirski pristop z uporabo nosilca pre-miRNA s človeško tRNA, izraženega z bakterijsko fermentacijo, za proizvodnjo funkcionalnih BioRNA/siRNA. Slednje se razlikujejo od kemično sintetiziranih siRNA, ker so v živih celicah podvržene naravnim posttranskripcijskim modifikacijam, pri čemer fizikalno-kemijske lastnosti, biološka aktivnost in varnostni profili odražajo naravne značilnosti RNA. Pokazali so, da proizvedena BioRNA/siRNA učinkovito uravnavava izražanje ciljnih genov, kar ponuja trajnostno in cenovno ugodno strategijo za proizvodnjo siRNA.
	Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].		Metoda naredi velik korak naprej za terapevtske možnosti, kar ima pomembne posledice za širok spekter bolezni [2].

Nataša Vujović: /* BioRNA/PD-L1-siRNA */

2025-05-19T19:03:26Z

BioRNA/PD-L1-siRNA

← Older revision		Revision as of 19:03, 19 May 2025
Line 41:		Line 41:
	Tudi kasnejše analize RT-qPCR in Western blot so pokazale znatno znižanje ravni mRNA PD-L1 (30-60 %) in proteina (70-80 %) v primerjavi s kontrolo. Imunofluorescenčna analiza je le potrdila predhodne ugotovitve, saj je pokazala zmanjšano izražanje PD-L1 na celični membrani [2].		Tudi kasnejše analize RT-qPCR in Western blot so pokazale znatno znižanje ravni mRNA PD-L1 (30-60 %) in proteina (70-80 %) v primerjavi s kontrolo. Imunofluorescenčna analiza je le potrdila predhodne ugotovitve, saj je pokazala zmanjšano izražanje PD-L1 na celični membrani [2].

	Za oceno posledic zmanjšanja izražanja PD-L1 so uporabili reporterski test, ki meri prekinitev signalizacije PD-1/PD-L1. V eksperimentu so uporabili gensko spremenjene T-celice Jurkat, ki izražajo PD-1 in celice CHO, ki prekomerno izražajo PD-L1. Test, ki posnema interakcije med T-celicami in tumorskimi celicami, je pokazal, da je BioRNA/PD-L1-siRNA uspešno zmanjšala izražanje PD-L1, obnovila signalizacijo T-celičnih receptorjev in aktivirala nadaljnje imunske odzive, kar se kaže v povečani luminiscenci.BioRNA/PD-L1-siRNA torej ne zgolj utiša ciljni gen, temveč tudi sproži imunsko aktivacijo z mogočim antitumorskim učinkom [2].		Za oceno posledic zmanjšanja izražanja PD-L1 so uporabili reporterski test, ki meri prekinitev signalizacije PD-1/PD-L1. V eksperimentu so uporabili gensko spremenjene T-celice Jurkat, ki izražajo PD-1 in celice CHO, ki prekomerno izražajo PD-L1. Test, ki posnema interakcije med T-celicami in tumorskimi celicami, je pokazal, da je BioRNA/PD-L1-siRNA uspešno zmanjšala izražanje PD-L1, obnovila signalizacijo T-celičnih receptorjev in aktivirala nadaljnje imunske odzive, kar se kaže v povečani luminiscenci. BioRNA/PD-L1-siRNA torej ne zgolj utiša ciljni gen, temveč tudi sproži imunsko aktivacijo z mogočim antitumorskim učinkom [2].

	== Zaključek ==		== Zaključek ==

Nataša Vujović: /* BioRNA/PD-L1-siRNA */

2025-05-19T19:01:48Z

BioRNA/PD-L1-siRNA

← Older revision		Revision as of 19:01, 19 May 2025
Line 39:		Line 39:
	=== BioRNA/PD-L1-siRNA ===		=== BioRNA/PD-L1-siRNA ===
	Preverili so tudi delovanje BioRNA/PD-L1-siRNA v okviru imunoterapije raka. PD-L1 (''angl.'' programmed death-ligand 1) je protein, ki ga izražajo tumorske celice in se veže na PD-1 na T celicah in zavira imunski odziv. Blokiranje PD-L1 je mehanizem po katerem delujejo mnoga biološka zdravila za raka, odobrena s strani FDA. Naredili so transfekcijo BioRNA/PD-L1-siRNA v celice NSCLC in ovarijske celice kitajskega hrčka (CHO). Selektivna analiza z RT-qPCR metodo je po 48 urah potrdila močno prisotnost zrele oblike siRNA, usmerjene proti PD-L1.		Preverili so tudi delovanje BioRNA/PD-L1-siRNA v okviru imunoterapije raka. PD-L1 (''angl.'' programmed death-ligand 1) je protein, ki ga izražajo tumorske celice in se veže na PD-1 na T celicah in zavira imunski odziv. Blokiranje PD-L1 je mehanizem po katerem delujejo mnoga biološka zdravila za raka, odobrena s strani FDA. Naredili so transfekcijo BioRNA/PD-L1-siRNA v celice NSCLC in ovarijske celice kitajskega hrčka (CHO). Selektivna analiza z RT-qPCR metodo je po 48 urah potrdila močno prisotnost zrele oblike siRNA, usmerjene proti PD-L1.
	Tudi kasnejše analize RT-qPCR in Western blot so pokazale znatno znižanje ravni mRNA PD-L1 (30-60 %) in proteina (70-80 %) v primerjavi s ~~kontrolnim zdravljenjem~~. Imunofluorescenčna analiza je le potrdila predhodne ugotovitve, saj je pokazala zmanjšano izražanje PD-L1 na celični membrani [2].		Tudi kasnejše analize RT-qPCR in Western blot so pokazale znatno znižanje ravni mRNA PD-L1 (30-60 %) in proteina (70-80 %) v primerjavi s kontrolo. Imunofluorescenčna analiza je le potrdila predhodne ugotovitve, saj je pokazala zmanjšano izražanje PD-L1 na celični membrani [2].

	Za oceno posledic zmanjšanja izražanja PD-L1 so uporabili reporterski test, ki meri prekinitev signalizacije PD-1/PD-L1. V eksperimentu so uporabili gensko spremenjene T-celice Jurkat, ki izražajo PD-1 in celice CHO, ki prekomerno izražajo PD-L1. Test, ki posnema interakcije med T-celicami in tumorskimi celicami, je pokazal, da je BioRNA/PD-L1-siRNA uspešno zmanjšala izražanje PD-L1, obnovila signalizacijo T-celičnih receptorjev in aktivirala nadaljnje imunske odzive, kar se kaže v povečani luminiscenci.BioRNA/PD-L1-siRNA torej ne zgolj utiša ciljni gen, temveč tudi sproži imunsko aktivacijo z mogočim antitumorskim učinkom [2].		Za oceno posledic zmanjšanja izražanja PD-L1 so uporabili reporterski test, ki meri prekinitev signalizacije PD-1/PD-L1. V eksperimentu so uporabili gensko spremenjene T-celice Jurkat, ki izražajo PD-1 in celice CHO, ki prekomerno izražajo PD-L1. Test, ki posnema interakcije med T-celicami in tumorskimi celicami, je pokazal, da je BioRNA/PD-L1-siRNA uspešno zmanjšala izražanje PD-L1, obnovila signalizacijo T-celičnih receptorjev in aktivirala nadaljnje imunske odzive, kar se kaže v povečani luminiscenci.BioRNA/PD-L1-siRNA torej ne zgolj utiša ciljni gen, temveč tudi sproži imunsko aktivacijo z mogočim antitumorskim učinkom [2].