PiRNA v boju za zaščito genoma - Revision history

Ns14829 at 22:37, 20 April 2026

2026-04-20T22:37:01Z

← Older revision		Revision as of 22:37, 20 April 2026
Line 29:		Line 29:

	=Prilagoditve piRNA-odvisne obrambe pred transpozoni v zarodnih celicah=		=Prilagoditve piRNA-odvisne obrambe pred transpozoni v zarodnih celicah=

	Novi transposomi in spremembe v biologiji celic zarodka zahtevajo prilagoditve obrambnih mehanizmov z uporabo novih piRNA in variabilnih kofaktorjev.		Novi transposomi in spremembe v biologiji celic zarodka zahtevajo prilagoditve obrambnih mehanizmov z uporabo novih piRNA in variabilnih kofaktorjev.
	Pri vinski mušici je najbolj aktivna družina transposomov gypsy endogenous retroviruses (ERVs). Te tvorijo delce, ki ogrožajo integriteto genoma sosednjih celic. Za obrambo pred takimi napadi somatske celice sosednjih že okuženih celic aktivirajo »Piwi-only« piRNA pot. Po te poti se sprostijo foliklji Piwi-piRNA kompleksa s primarno piRNA, ki hitro prevzame vlogo utišanja ko-transkripcije endogenih retrovirusov.		Pri vinski mušici je najbolj aktivna družina transposomov gypsy endogenous retroviruses (ERVs). Te tvorijo delce, ki ogrožajo integriteto genoma sosednjih celic. Za obrambo pred takimi napadi somatske celice sosednjih že okuženih celic aktivirajo »Piwi-only« piRNA pot. Po te poti se sprostijo foliklji Piwi-piRNA kompleksa s primarno piRNA, ki hitro prevzame vlogo utišanja ko-transkripcije endogenih retrovirusov.
Line 35:		Line 34:
	Prekurzorski piRNA je zapisan v piRNA grozdih, ki pri vinski mušici potrebujejo prisotnost homologa HP1, rhino in njegovih kofaktorjev deadlock in cutoff, da pride do izražanja. Obstajajo pa tudi grozdi oziroma predeli imenovani Flamenco, ki ne potrebujejo teh faktorjev, da se izražajo in igrajo ključno vlogo pri sintezi prekurzorske piRNA. Mutacija le teh vodi v neplodnost ženskih zarodnih celic. Aktivnost tega predela je ključna za obrambo proti retrovirusom. PiRNA vodena obramba proti transposomom somatskih celic spolnih žlez je specifična za vinske mušice in jo do sedaj niso zasledili v sesalskih celicah.		Prekurzorski piRNA je zapisan v piRNA grozdih, ki pri vinski mušici potrebujejo prisotnost homologa HP1, rhino in njegovih kofaktorjev deadlock in cutoff, da pride do izražanja. Obstajajo pa tudi grozdi oziroma predeli imenovani Flamenco, ki ne potrebujejo teh faktorjev, da se izražajo in igrajo ključno vlogo pri sintezi prekurzorske piRNA. Mutacija le teh vodi v neplodnost ženskih zarodnih celic. Aktivnost tega predela je ključna za obrambo proti retrovirusom. PiRNA vodena obramba proti transposomom somatskih celic spolnih žlez je specifična za vinske mušice in jo do sedaj niso zasledili v sesalskih celicah.
	Nekateri transposomi so se prilagodili na različne razvojne stopnje organizma. Če na primer pride do mutacij RNA helikaze MOV10L1 med spermatogenezo, pride v miših do povečanega izražanja transposomov med mejozo. Enaka mutacija pri zlatih hrčkih vodi v neuspešno vzpostavitev predmejotskih spermatogonijev. Raziskave kažejo, da je fenotip mutacije piRNA poti odvisen od aktivnosti prisotnih transposomov v različnih stopnjah razvoja.		Nekateri transposomi so se prilagodili na različne razvojne stopnje organizma. Če na primer pride do mutacij RNA helikaze MOV10L1 med spermatogenezo, pride v miših do povečanega izražanja transposomov med mejozo. Enaka mutacija pri zlatih hrčkih vodi v neuspešno vzpostavitev predmejotskih spermatogonijev. Raziskave kažejo, da je fenotip mutacije piRNA poti odvisen od aktivnosti prisotnih transposomov v različnih stopnjah razvoja.

			=Časovni razvoj ločuje dve različni skupini piRNA=
			Pri sesalcih poznamo dva razreda piRNA, ki se razvijeta v različnem obdobju razvoja. Poznamo piRNA, ki se razvije v zgodnji fazi predmejotske delitve zarodnih celic (ang. pre-pachytene) ter piRNA, ki nastane v fazi mejoze I (ang. pachytene). PiRNA zgodnje profaze 1 razdelimo na dve vrsti, fetalne in postnatalne. Fetalne piRNA se povezujejo s PIWI proteini PIWIL2/MILI in PIWIL4/MIWI2. Naloga nastalih kompleksov je utišanje transposomov. Postnatalni piRNA pa nastanejo iz transposomov in molekul mRNA ter se povezujejo s citoplazemski PIWI proteini PIWIL2/MILI.

			Protein PIWIL1/MIWI se pojavi šele v fazi mejoze I. V času mejoze I prevladuje pomanjkanje piRNA, ki nastane iz transposomov ter ping-pong način amplifikacije je inhibiran. Posledično se v času mejoze I celice močno zanašajo na delovanje PIWIL1/MIWI, ki nase veže piRNA, ki nastane iz prekurzorjev za katere geni se nahajajo na daljših neoznačenih regijah genoma. Če pride do izpada gena za PIWIL1/MIWI to vodi do moške sterilnosti ter zarodne celice se ustavijo na stopnji okroglih spermatid in se ne razvijejo v zrele semenčice.

			Namesto transposomov, kateri so bili večinoma utišani v predhodnih fazah razvoja, PIWIL1/MIWI piRNA kompleks »nadzoruje« mRNA in je ključen pri razvoju in zorenju semenčec.

Ns14829 at 22:28, 20 April 2026

2026-04-20T22:28:49Z

← Older revision		Revision as of 22:28, 20 April 2026
Line 28:		Line 28:
	Kombinacija modulov biogeneze in efektorskih modulov se razlikuje med posameznimi PIWI proteini in med različnimi organizmi. PIWI proteini so lahko naloženi s primarnimi ali sekundarnimi piRNA ali pa z obojimi ter lahko sodelujejo bodisi pri transkripcijskem in post-transkripcijskem utišanju. Poznamo dve skupini helikaz, ki sodelujeta pri modulih PIWI piRNA kompleksov. Helikaza Armitage/MOV10L1 se povezuje z ZUC in pomaga pri primarni biogenezi ter helikaza Vasa/DDX4, ki pomaga vezati sekundarno piRNA na PIWI proteine. Drosophila melanogaster kodira tri PIWI proteine, Piwi, Aub in Ago3. PIWI kompleksi gredo lahko v jedro med tem ko kompleksi z drugima dvema proteinoma ostanejo v citosolu. Tudi mišji genom kodira tri vrste PIWI proteinov, in to so PIWIL1/MIWI, PIWIL2/MILI ter PIWIL4/MIWI2. PIWIL1/MIWI veže primarno piRNA in razgrajuje tarčno RNA v citosolu. PIWIL4/MIWI2 veže sekundarno piRNA, ki nastane s pomočjo PIWIL2/MILI piRNA kompleksa, in se premakne v jedro kjer opravlja ko-transkripcijske modifikacije.		Kombinacija modulov biogeneze in efektorskih modulov se razlikuje med posameznimi PIWI proteini in med različnimi organizmi. PIWI proteini so lahko naloženi s primarnimi ali sekundarnimi piRNA ali pa z obojimi ter lahko sodelujejo bodisi pri transkripcijskem in post-transkripcijskem utišanju. Poznamo dve skupini helikaz, ki sodelujeta pri modulih PIWI piRNA kompleksov. Helikaza Armitage/MOV10L1 se povezuje z ZUC in pomaga pri primarni biogenezi ter helikaza Vasa/DDX4, ki pomaga vezati sekundarno piRNA na PIWI proteine. Drosophila melanogaster kodira tri PIWI proteine, Piwi, Aub in Ago3. PIWI kompleksi gredo lahko v jedro med tem ko kompleksi z drugima dvema proteinoma ostanejo v citosolu. Tudi mišji genom kodira tri vrste PIWI proteinov, in to so PIWIL1/MIWI, PIWIL2/MILI ter PIWIL4/MIWI2. PIWIL1/MIWI veže primarno piRNA in razgrajuje tarčno RNA v citosolu. PIWIL4/MIWI2 veže sekundarno piRNA, ki nastane s pomočjo PIWIL2/MILI piRNA kompleksa, in se premakne v jedro kjer opravlja ko-transkripcijske modifikacije.

			=Prilagoditve piRNA-odvisne obrambe pred transpozoni v zarodnih celicah=

			Novi transposomi in spremembe v biologiji celic zarodka zahtevajo prilagoditve obrambnih mehanizmov z uporabo novih piRNA in variabilnih kofaktorjev.
			Pri vinski mušici je najbolj aktivna družina transposomov gypsy endogenous retroviruses (ERVs). Te tvorijo delce, ki ogrožajo integriteto genoma sosednjih celic. Za obrambo pred takimi napadi somatske celice sosednjih že okuženih celic aktivirajo »Piwi-only« piRNA pot. Po te poti se sprostijo foliklji Piwi-piRNA kompleksa s primarno piRNA, ki hitro prevzame vlogo utišanja ko-transkripcije endogenih retrovirusov.

			Prekurzorski piRNA je zapisan v piRNA grozdih, ki pri vinski mušici potrebujejo prisotnost homologa HP1, rhino in njegovih kofaktorjev deadlock in cutoff, da pride do izražanja. Obstajajo pa tudi grozdi oziroma predeli imenovani Flamenco, ki ne potrebujejo teh faktorjev, da se izražajo in igrajo ključno vlogo pri sintezi prekurzorske piRNA. Mutacija le teh vodi v neplodnost ženskih zarodnih celic. Aktivnost tega predela je ključna za obrambo proti retrovirusom. PiRNA vodena obramba proti transposomom somatskih celic spolnih žlez je specifična za vinske mušice in jo do sedaj niso zasledili v sesalskih celicah.
			Nekateri transposomi so se prilagodili na različne razvojne stopnje organizma. Če na primer pride do mutacij RNA helikaze MOV10L1 med spermatogenezo, pride v miših do povečanega izražanja transposomov med mejozo. Enaka mutacija pri zlatih hrčkih vodi v neuspešno vzpostavitev predmejotskih spermatogonijev. Raziskave kažejo, da je fenotip mutacije piRNA poti odvisen od aktivnosti prisotnih transposomov v različnih stopnjah razvoja.

Ns14829 at 22:24, 20 April 2026

2026-04-20T22:24:45Z

← Older revision		Revision as of 22:24, 20 April 2026
Line 25:		Line 25:
	Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2). -ŽF		Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2). -ŽF

			=Različne kombinacije modulov biogeneze in efektorskih modulov=
			Kombinacija modulov biogeneze in efektorskih modulov se razlikuje med posameznimi PIWI proteini in med različnimi organizmi. PIWI proteini so lahko naloženi s primarnimi ali sekundarnimi piRNA ali pa z obojimi ter lahko sodelujejo bodisi pri transkripcijskem in post-transkripcijskem utišanju. Poznamo dve skupini helikaz, ki sodelujeta pri modulih PIWI piRNA kompleksov. Helikaza Armitage/MOV10L1 se povezuje z ZUC in pomaga pri primarni biogenezi ter helikaza Vasa/DDX4, ki pomaga vezati sekundarno piRNA na PIWI proteine. Drosophila melanogaster kodira tri PIWI proteine, Piwi, Aub in Ago3. PIWI kompleksi gredo lahko v jedro med tem ko kompleksi z drugima dvema proteinoma ostanejo v citosolu. Tudi mišji genom kodira tri vrste PIWI proteinov, in to so PIWIL1/MIWI, PIWIL2/MILI ter PIWIL4/MIWI2. PIWIL1/MIWI veže primarno piRNA in razgrajuje tarčno RNA v citosolu. PIWIL4/MIWI2 veže sekundarno piRNA, ki nastane s pomočjo PIWIL2/MILI piRNA kompleksa, in se premakne v jedro kjer opravlja ko-transkripcijske modifikacije.

TimonJ: /* Evolucijski izvor transpozonov */

2026-04-20T20:44:42Z

Evolucijski izvor transpozonov

← Older revision		Revision as of 20:44, 20 April 2026
Line 3:		Line 3:

	=Evolucijski izvor transpozonov=		=Evolucijski izvor transpozonov=
	Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje. -TJ		Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje. -TJ

	=piRNA v zarodnih celicah=		=piRNA v zarodnih celicah=

TimonJ: /* Evolucijski izvor transpozonov */

2026-04-20T20:43:54Z

Evolucijski izvor transpozonov

← Older revision		Revision as of 20:43, 20 April 2026
Line 3:		Line 3:

	=Evolucijski izvor transpozonov=		=Evolucijski izvor transpozonov=
	Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje. -TJ		Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje. -TJ

	=piRNA v zarodnih celicah=		=piRNA v zarodnih celicah=

TimonJ at 19:45, 20 April 2026

2026-04-20T19:45:12Z

← Older revision		Revision as of 19:45, 20 April 2026
Line 1:		Line 1:
	=Uvod=		=Uvod=
	Pri živalskih zarodnih celicah zaščitni mehanizem pred škodljivimi učinki transpozonov predstavljajo PIWI proteini in piRNA. PiRNA je RNA, ki interagira s PIWI proteini in je ena od treh ohranjenih malih utiševalnih RNA v evkariontih; drugi dve sta še siRNA (mala interferenčna RNA) in miRNA (mikro RNA). Skupaj s PIWI proteini je odgovorna za preprečevanje premikanja transpozicijskih elementov (transpozonov) v zarodnih celicah in posledično varovanje stabilnosti genoma zarodne linije. PIWI-piRNA kompleksi delujejo na dveh ravneh. Prva raven je prepoznavanje traspozonov in njihovo epigenetsko utišanje, druga raven pa je prepoznavanje transkriptov transpozonov in njihova razgradnja.		Pri živalskih zarodnih celicah zaščitni mehanizem pred škodljivimi učinki transpozonov predstavljajo PIWI proteini in piRNA. PiRNA je RNA, ki interagira s PIWI proteini in je ena od treh ohranjenih malih utiševalnih RNA v evkariontih; drugi dve sta še siRNA (mala interferenčna RNA) in miRNA (mikro RNA). Skupaj s PIWI proteini je odgovorna za preprečevanje premikanja transpozicijskih elementov (transpozonov) v zarodnih celicah in posledično varovanje stabilnosti genoma zarodne linije. PIWI-piRNA kompleksi delujejo na dveh ravneh. Prva raven je prepoznavanje traspozonov in njihovo epigenetsko utišanje, druga raven pa je prepoznavanje transkriptov transpozonov in njihova razgradnja. -ŽF

	=Evolucijski izvor transpozonov=		=Evolucijski izvor transpozonov=
	Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje.		Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje. -TJ

	=piRNA v zarodnih celicah=		=piRNA v zarodnih celicah=
	Transpozoni se zaradi homologne rekombinacije lažje širijo v diploidnih organizmih, ker niso ujeti v eno klonsko linijo. Z vidika transpozona je optimalno, da se čim manj izraža v somatskih celicah, ker so evolucijska slepa ulica, in čim več v spolnih. Zato se tudi nekateri transpozoni preferenčno vstavljajo v tihe regije genoma v katerih so pogosto metilirani. Ker se ob tvorbi novega zarodka večina metilacije izbriše, se začnejo masovno izražati, kar je katastrofalno za celico. Zato ima prav v tem kritičnem odbobju najbolj izražen piRNA obrambni mehanizem.		Transpozoni se zaradi homologne rekombinacije lažje širijo v diploidnih organizmih, ker niso ujeti v eno klonsko linijo. Z vidika transpozona je optimalno, da se čim manj izraža v somatskih celicah, ker so evolucijska slepa ulica, in čim več v spolnih. Zato se tudi nekateri transpozoni preferenčno vstavljajo v tihe regije genoma v katerih so pogosto metilirani. Ker se ob tvorbi novega zarodka večina metilacije izbriše, se začnejo masovno izražati, kar je katastrofalno za celico. Zato ima prav v tem kritičnem odbobju najbolj izražen piRNA obrambni mehanizem. -TJ

	=Vertikalni prenos piRNA=		=Vertikalni prenos piRNA=
	Nekatere regije v genomu imajo visoko koncentracijo piRNA genov, pravimo jim piRNA gruče. Te se prenašajo dedno in predstavljajo knjižnico vseh celici znanih transpozonov. Zanimivo je, da zgodnji zarodek nima še lastnega izražanja piRNA in mu v tem odbobju mati prispeva piRNA, zato je lahko odporen na transpozone tudi, če potrebnih piRNA ne izraža, so pa v genomu matere. Novi transpozoni, za katere organizmi nimajo še obrambnih mehanizmov, se v zgodnji fazi pogosto hitro namnožijo. Temu pravimo maternalni efekt.		Nekatere regije v genomu imajo visoko koncentracijo piRNA genov, pravimo jim piRNA gruče. Te se prenašajo dedno in predstavljajo knjižnico vseh celici znanih transpozonov. Zanimivo je, da zgodnji zarodek nima še lastnega izražanja piRNA in mu v tem odbobju mati prispeva piRNA, zato je lahko odporen na transpozone tudi, če potrebnih piRNA ne izraža, so pa v genomu matere. Novi transpozoni, za katere organizmi nimajo še obrambnih mehanizmov, se v zgodnji fazi pogosto hitro namnožijo. Temu pravimo maternalni efekt. -TJ

	=Primarna piRNA=		=Primarna piRNA=
Line 16:		Line 16:
	ZUC/PLD6 nukleaza je zasidrana v zunanjo membrano mitohondrija, njena RNA vezavna katalitična domena pa je obrnjena proti citoplazmi. Ima veliko strukturno in funkcijsko ohranjenost. Njeno vezavno mesto za substrat pa je specifično, veže lahko namreč le enojno verigo nukleotidov in ne dvojne.		ZUC/PLD6 nukleaza je zasidrana v zunanjo membrano mitohondrija, njena RNA vezavna katalitična domena pa je obrnjena proti citoplazmi. Ima veliko strukturno in funkcijsko ohranjenost. Njeno vezavno mesto za substrat pa je specifično, veže lahko namreč le enojno verigo nukleotidov in ne dvojne.

	Primarne piRNA imajo kot zadnjo bazo na 5’ koncu večinoma uracil, kar je posledica dveh procesov. Prvi je procesiranje piRNA, kjer ZUC procesorski kompleks preferenčno cepi na fragmente, ki imajo na 5’ koncu pirimidinsko bazo. Drugi je vezava na PIWI proteine, kjer citozin tvori manj ugodne interakcije zaradi steričnega oviranja pri vezavi v žep proteina, zato je favoriziran uracil. Podobno tudi na 3’ koncu.		Primarne piRNA imajo kot zadnjo bazo na 5’ koncu večinoma uracil, kar je posledica dveh procesov. Prvi je procesiranje piRNA, kjer ZUC procesorski kompleks preferenčno cepi na fragmente, ki imajo na 5’ koncu pirimidinsko bazo. Drugi je vezava na PIWI proteine, kjer citozin tvori manj ugodne interakcije zaradi steričnega oviranja pri vezavi v žep proteina, zato je favoriziran uracil. Podobno tudi na 3’ koncu. -ŽF

	=Sekundarna piRNA in ping pong amplifikacija=		=Sekundarna piRNA in ping pong amplifikacija=
Line 23:		Line 23:
	PIWI proteini so piRNA vodene nukleaze, ki cepijo tarčno RNA med desetim in enajstim nukleotidom glede na piRNA in tako izvajajo post-translacijsko utišanje v citoplazmi. Da se na njih vežejo fragmenti sekundarne piRNA pa je potrebna specifična RNA helikaza imenovana Vasa/DDX4, proces pa je nadziran s Tudor proteini. Ta proces se lahko ponavlja, saj novonastali piRNA-PIWI kompleksi lahko, tako kot primarni, ustvarjajo novo sekundarno piRNA. Taki amplifikaciji piRNA rečemo ping-pong cikel.		PIWI proteini so piRNA vodene nukleaze, ki cepijo tarčno RNA med desetim in enajstim nukleotidom glede na piRNA in tako izvajajo post-translacijsko utišanje v citoplazmi. Da se na njih vežejo fragmenti sekundarne piRNA pa je potrebna specifična RNA helikaza imenovana Vasa/DDX4, proces pa je nadziran s Tudor proteini. Ta proces se lahko ponavlja, saj novonastali piRNA-PIWI kompleksi lahko, tako kot primarni, ustvarjajo novo sekundarno piRNA. Taki amplifikaciji piRNA rečemo ping-pong cikel.

	Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2).		Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2). -ŽF

TimonJ at 19:43, 20 April 2026

2026-04-20T19:43:57Z

← Older revision		Revision as of 19:43, 20 April 2026
Line 1:		Line 1:
	=Uvod=		=Uvod=
	Pri živalskih zarodnih celicah zaščitni mehanizem pred škodljivimi učinki transpozonov predstavljajo PIWI proteini in piRNA. ~~piRNA~~ je RNA, ki interagira s PIWI proteini in je ena od treh ohranjenih malih utiševalnih RNA v evkariontih; drugi dve sta še siRNA (mala interferenčna RNA) in miRNA (mikro RNA). Skupaj s PIWI proteini je odgovorna za preprečevanje premikanja transpozicijskih elementov (transpozonov) v zarodnih celicah in posledično varovanje stabilnosti genoma zarodne linije. PIWI-piRNA kompleksi delujejo na dveh ravneh. Prva raven je prepoznavanje traspozonov in njihovo epigenetsko utišanje, druga raven pa je prepoznavanje transkriptov transpozonov in njihova razgradnja.		Pri živalskih zarodnih celicah zaščitni mehanizem pred škodljivimi učinki transpozonov predstavljajo PIWI proteini in piRNA. PiRNA je RNA, ki interagira s PIWI proteini in je ena od treh ohranjenih malih utiševalnih RNA v evkariontih; drugi dve sta še siRNA (mala interferenčna RNA) in miRNA (mikro RNA). Skupaj s PIWI proteini je odgovorna za preprečevanje premikanja transpozicijskih elementov (transpozonov) v zarodnih celicah in posledično varovanje stabilnosti genoma zarodne linije. PIWI-piRNA kompleksi delujejo na dveh ravneh. Prva raven je prepoznavanje traspozonov in njihovo epigenetsko utišanje, druga raven pa je prepoznavanje transkriptov transpozonov in njihova razgradnja.

			=Evolucijski izvor transpozonov=
			Celico si pogosto predstavljamo kot celoto, ki deluje v harmoniji, ampak v resnici gre za skupek sebičnih elementov. Pogosto je fitnes genetskega elementa vezan na fitnes celice, zato geni sodelujejo, vendar zaradi gibljivosti fitnes transpozonov ni popolnoma usklajen s fitnesom celice. Zavzemajo posebno ekološko nišo znotraj celice in pogosto škodijo celici. Transpozoni, ki zvišajo svoj fitnes več kot znižajo fitnes celice, se bodo v populaciji širili na škodo celice, zato so se v celici razvili obrambni mehanizmi, med njimi piRNA sistem. Transpozoni so lahko tudi koristni za celico, saj so vir novih mutacij in nadziranje števila transpozonov je tipičen primer kompromisa robustnosti in evolvabilnosti. Transpozon je sestavljen iz robnih inverznih ponovitev in vmesnega dela, ki lahko vsebuje gene ali promotorje.

			=piRNA v zarodnih celicah=
			Transpozoni se zaradi homologne rekombinacije lažje širijo v diploidnih organizmih, ker niso ujeti v eno klonsko linijo. Z vidika transpozona je optimalno, da se čim manj izraža v somatskih celicah, ker so evolucijska slepa ulica, in čim več v spolnih. Zato se tudi nekateri transpozoni preferenčno vstavljajo v tihe regije genoma v katerih so pogosto metilirani. Ker se ob tvorbi novega zarodka večina metilacije izbriše, se začnejo masovno izražati, kar je katastrofalno za celico. Zato ima prav v tem kritičnem odbobju najbolj izražen piRNA obrambni mehanizem.

			=Vertikalni prenos piRNA=
			Nekatere regije v genomu imajo visoko koncentracijo piRNA genov, pravimo jim piRNA gruče. Te se prenašajo dedno in predstavljajo knjižnico vseh celici znanih transpozonov. Zanimivo je, da zgodnji zarodek nima še lastnega izražanja piRNA in mu v tem odbobju mati prispeva piRNA, zato je lahko odporen na transpozone tudi, če potrebnih piRNA ne izraža, so pa v genomu matere. Novi transpozoni, za katere organizmi nimajo še obrambnih mehanizmov, se v zgodnji fazi pogosto hitro namnožijo. Temu pravimo maternalni efekt.

	=Primarna piRNA=		=Primarna piRNA=

Zan.filipic at 15:44, 19 April 2026

2026-04-19T15:44:23Z

← Older revision		Revision as of 15:44, 19 April 2026
Line 3:		Line 3:

	=Primarna piRNA=		=Primarna piRNA=
	Ko se prekurzorska pi-RNA ~~prepiše iz genoma~~, se transportira v citoplazmo do površine mitohondrijev in zarodnih granul, kjer se procesira. Endonukleaza Zucchini/PLD6 (ZUC), tam cepi prekurzorsko pi-RNA na manjše 5’ monofosforilirane fragmente. Te se naložijo na PIWI proteine in z njimi tvorijo pre-piRNA komplekse, ki se procesirajo še na 3’ koncu (z ZUC) in tvorijo zrel PIWI-piRNA kompleks. Ta gre lahko nazaj v jedro in prepozna tarčna zaporedja transpozonov s komplementarnim parjenjem baz. Nato omogoči vezavo kofaktorjev (histonske in DNA metiltransferaze), ki utišajo prepoznane transpozone.		Biogeneza primarne piRNA se začne s prepisovanjem genomskih regij imenovanih piRNA gruče. Tako nastane prekurzorska pi-RNA, ki se transportira v citoplazmo do površine mitohondrijev in zarodnih granul, kjer se procesira. Endonukleaza Zucchini/PLD6 (ZUC), tam cepi prekurzorsko pi-RNA na manjše 5’ monofosforilirane fragmente. Te se naložijo na PIWI proteine in z njimi tvorijo pre-piRNA komplekse, ki se procesirajo še na 3’ koncu (z ZUC) in tvorijo zrel PIWI-piRNA kompleks. Ta gre lahko nazaj v jedro in prepozna tarčna zaporedja transpozonov s komplementarnim parjenjem baz. Nato omogoči vezavo kofaktorjev (histonske in DNA metiltransferaze), ki utišajo prepoznane transpozone.

	ZUC/PLD6 nukleaza je zasidrana v zunanjo membrano mitohondrija, njena RNA vezavna katalitična domena pa je obrnjena proti citoplazmi. Ima veliko strukturno in funkcijsko ohranjenost. Njeno vezavno mesto za substrat pa je specifično, veže lahko namreč le enojno verigo nukleotidov in ne dvojne.		ZUC/PLD6 nukleaza je zasidrana v zunanjo membrano mitohondrija, njena RNA vezavna katalitična domena pa je obrnjena proti citoplazmi. Ima veliko strukturno in funkcijsko ohranjenost. Njeno vezavno mesto za substrat pa je specifično, veže lahko namreč le enojno verigo nukleotidov in ne dvojne.

Zan.filipic at 17:05, 18 April 2026

2026-04-18T17:05:25Z

← Older revision	Revision as of 17:05, 18 April 2026
Line 25:	Line 25:


		=Viri=
		Z. Loubalova, P. Konstantinidou, A. D. Haase: Themes and variations on piRNA-guided transposon control. Mob DNA 2023, 14, 10. DOI: 10.1186/s13100-023-00298-2

		Transpozoni - Wiki FKKT. https://wiki.fkkt.uni-lj.si/index.php/Transpozoni (pridobljeno 18. apr. 2026).

		Germ Cell – Sasaki Lab. https://sasaki-lab.org/research/germ-cell/ (pridobljeno 18. apr. 2026).

		E. Voronina, G. Seydoux, P. Sassone-Corsi, I. Nagamori: RNA Granules in Germ Cells. Cold Spring Harb Perspect Biol 2011, 3, a002774. DOI: 10.1101/cshperspect.a002774

Zan.filipic at 16:59, 18 April 2026

2026-04-18T16:59:32Z

← Older revision		Revision as of 16:59, 18 April 2026
Line 12:		Line 12:
	PIWI-piRNA kompleksi pa lahko po nastanku ostanejo tudi v citoplazmi in sprožijo post-transkripcijsko utišanje genov z razgradnjo tarčne RNA. Cepitev tarčnih RNA povzroči nastanek 5’ monofosforiliranih fragmentov, ki se lahko ali naprej razgradijo z eksonukleazami, ali pa se naložijo na PIWI proteine in tvorijo sekundarno piRNA.		PIWI-piRNA kompleksi pa lahko po nastanku ostanejo tudi v citoplazmi in sprožijo post-transkripcijsko utišanje genov z razgradnjo tarčne RNA. Cepitev tarčnih RNA povzroči nastanek 5’ monofosforiliranih fragmentov, ki se lahko ali naprej razgradijo z eksonukleazami, ali pa se naložijo na PIWI proteine in tvorijo sekundarno piRNA.

	PIWI proteini so piRNA vodene nukleaze, ki cepijo tarčno RNA med desetim in enajstim nukleotidom glede na piRNA in tako izvajajo post-translacijsko utišanje v citoplazmi. ~~Ko razrežejo tarčno RNA~~ na ~~fragmente, so te~~ fragmenti ~~razgradijo ali pa se vežejo na drug PIWI protein in nastane sekundarna piRNA. Za vezavo fragmentov~~ sekundarne piRNA pa je potrebna specifična RNA helikaza imenovana Vasa/DDX4, proces pa je nadziran s Tudor proteini. Ta proces se lahko ponavlja, saj novonastali piRNA-PIWI kompleksi lahko, tako kot primarni, ustvarjajo novo sekundarno piRNA. Taki amplifikaciji piRNA rečemo ping-pong cikel.		PIWI proteini so piRNA vodene nukleaze, ki cepijo tarčno RNA med desetim in enajstim nukleotidom glede na piRNA in tako izvajajo post-translacijsko utišanje v citoplazmi. Da se na njih vežejo fragmenti sekundarne piRNA pa je potrebna specifična RNA helikaza imenovana Vasa/DDX4, proces pa je nadziran s Tudor proteini. Ta proces se lahko ponavlja, saj novonastali piRNA-PIWI kompleksi lahko, tako kot primarni, ustvarjajo novo sekundarno piRNA. Taki amplifikaciji piRNA rečemo ping-pong cikel.

	Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2).		Poznamo heterotipični in homotipični ping-pong cikel. Primer heterotipičnega najdemo v jajčnikih vinske mušice, kjer kompleksi Aub–piRNA (Aubergine-piRNA) z rezanjem ustvarijo fragmente, ki se naložijo na Ago3 (Argonaute-3) in obratno. Za začetek cikla pa je potreben Aubergine, saj se lahko primarna piRNA veže le nanj, ne more pa se vezati na Ago3. Pri homotipičnem ping-pong ciklu pa namesto dveh PIWI proteinov nastopa le eden. Najdemo ga v miših, kjer je vanj udeležen PIWIL2 (PIWI like protein 2).