Prvi poskusi zdravljenja z RNAi - Revision history

AnaDolinar: /* Osnove */

2012-04-04T21:28:03Z

Osnove

← Older revision		Revision as of 21:28, 4 April 2012
Line 25:		Line 25:
	===Osnove===		===Osnove===
	Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.		Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.
	'''VEGF''' je skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil, ki tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je VEGF A preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.		'''VEGF''' je skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil, ki tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je [http://goo.gl/TZRN8 VEGF A] preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.
	Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.		Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.

AnaDolinar: /* siRNA in VEGF */

2012-04-04T21:18:06Z

siRNA in VEGF

← Older revision		Revision as of 21:18, 4 April 2012
Line 30:		Line 30:
	===RNA interferenca kot potencialno zdravilo===		===RNA interferenca kot potencialno zdravilo===
	====<font size=+1 color=#CC0099>'''siRNA in VEGF'''</font><br/>====		====<font size=+1 color=#CC0099>'''siRNA in VEGF'''</font><br/>====
	Leta 2003 so zasnovali raziskavo, kjer so z uporabo RNA interference želeli ugotoviti, kako se VEGF odziva na interferenčno RNA (siRNA). V izbrani celični liniji so s transfekcijo vnesli siRNA za človeški VEGF, kot kontrolo pa so uporabili sistem, kjer so VEGF-siRNA nadomestili z interferenčno RNA za zeleni fluorescentni protein (EGFP-siRNA). Po enem dnevu so v celicah vzbudili hipoksično stanje (stanje, kjer primanjkuje kisika) ter tako izzvali povečano izražanje VEGF genov. Dokazali so, da je siRNA, specifična za VEGF mRNA, občutno zmanjšala koncentracijo produkta. V kontrolnih celicah ni bilo opaznega inhibitornega učinka. Ker so z ''in vitro'' poskusi dokazali, da je metoda učinkovita, so v naslednji stopnji izvedli poskuse ''in vivo''. <br/>		Leta 2003 so zasnovali raziskavo, kjer so z uporabo RNA interference želeli ugotoviti, kako se VEGF odziva na interferenčno RNA (siRNA). V izbrani celični liniji (HeLa celice in "293" celice - ledvične celice človeškega zarodka) so s transfekcijo vnesli siRNA za človeški VEGF, kot kontrolo pa so uporabili sistem, kjer so VEGF-siRNA nadomestili z interferenčno RNA za zeleni fluorescentni protein (EGFP-siRNA). Po enem dnevu so v celicah vzbudili hipoksično stanje (stanje, kjer primanjkuje kisika) ter tako izzvali povečano izražanje VEGF genov. Dokazali so, da je siRNA, specifična za VEGF mRNA, občutno zmanjšala koncentracijo produkta. V kontrolnih celicah ni bilo opaznega inhibitornega učinka. Ker so z ''in vitro'' poskusi dokazali, da je metoda učinkovita, so v naslednji stopnji izvedli poskuse ''in vivo''. <br/>
	Najprej so preverili, če je možno siRNA učinkovito dozirati v epitelijske celice mrežnice. Pri tem so uporabili miške in sistem EGFP/EGFP-siRNA. Vnos so izvedli z injekcijami v subretinalno področje (področje pod mrežnico). Rezultati so bili analizirani s pregledom očesnega ozadja in histološkimi rezinami. <br/>		Najprej so preverili, če je možno siRNA učinkovito dozirati v epitelijske celice mrežnice. Pri tem so uporabili miške in sistem EGFP/EGFP-siRNA. Vnos so izvedli z injekcijami v subretinalno področje (področje pod mrežnico). Rezultati so bili analizirani s pregledom očesnega ozadja in histološkimi rezinami. <br/>
	Doslej uporabljeni VEGF je bil človeški, zato jih je zanimalo tudi, ali je učinkovitost siRNA enaka pri mišjem VEGF. Dokazali so, da je metoda primerna za zdravljenje degeneracije rumene pege v miših.		Doslej uporabljeni VEGF je bil človeški, zato jih je zanimalo tudi, ali je učinkovitost siRNA enaka pri mišjem VEGF. Dokazali so, da je metoda primerna za zdravljenje degeneracije rumene pege v miših.

AnaDolinar: /* Osnove */

2012-04-04T20:52:27Z

Osnove

← Older revision		Revision as of 20:52, 4 April 2012
Line 25:		Line 25:
	===Osnove===		===Osnove===
	Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.		Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.
	'''VEGF''' je skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil ~~in tako~~ tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je VEGF A preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.		'''VEGF''' je skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil, ki tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je VEGF A preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.
	Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.		Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.

AnaDolinar: /* Osnove */

2012-04-04T20:52:00Z

Osnove

← Older revision		Revision as of 20:52, 4 April 2012
Line 25:		Line 25:
	===Osnove===		===Osnove===
	Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.		Znano je, da igrata rastni faktor žilnega epitelija (vascular endothelial growth factor, VEGF) in njegov receptor (VEGFR) pomembno vlogo pri ožiljenju tkiv.
	'''VEGF''' so skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil in tako tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je VEGF A preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.		'''VEGF''' je skupina rastnih faktorjev, ki imajo pomembno vlogo pri tvorbi novih žil in tako tkivom zagotavljajo oskrbo s kisikom. Pri degeneraciji rumene pege je VEGF A preveč izražen, zato razvoj žil poteka pospešeno.
	Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.		Za pravilno ožiljenje mrežnice sta potrebna dva receptorja, '''VEGF receptor 1''' in '''VEGF receptor 2'''. VEGF receptor 1 nase veže ligande VEGF receptorja 2 in ga tako negativno regulira. Taka regulacija je nujno potrebna v razvoju zarodka, da ne pride do povečane tvorbe žil. Stimulacija VEGF receptorja 1 v kasnejših obdobjih lahko povzroči povečano izločanje nekaterih rastnih faktorjev iz žilnega epitelija, kar vodi v patološka stanja.

AnaDolinar: /* Fulminantni hepatitis */

2012-04-04T20:34:05Z

Fulminantni hepatitis

← Older revision		Revision as of 20:34, 4 April 2012
Line 2:		Line 2:

	==Fulminantni hepatitis==		==Fulminantni hepatitis==
	Fulminantni hepatitis je redka in pogosto usodna oblika akutnega hepatitisa, pri katerem se bolnikovo stanje hitro poslabša, pri tem se pojavijo jeterna encefalopatija, nekroza jetrnega tkiva, motnje strjevanja krvi, odpoved ledvic in koma.		Fulminantni hepatitis je redka in pogosto usodna oblika akutnega hepatitisa, pri katerem se bolnikovo stanje hitro poslabša. Možni zapleti, ki se pri tem pojavijo, so jeterna encefalopatija, nekroza jetrnega tkiva, motnje strjevanja krvi, odpoved ledvic in koma.

	===Mehanizem s Fas povzročene apoptoze===		===Mehanizem s Fas povzročene apoptoze===
	S Fas povzročena apoptoza je lahko regulirana z različnimi signalnimi potmi v celicah in je potrebna za normalno celično delovanje. Ena od glavnih vlog Fas receptorja je regulacija imunskega odgovora in to je najbolj očitna značilna funkcija receptorja Fas, ki ga izraža veliko različnih celic. Fas ligand (FasL) je celična membranska molekula, ki se veže z receptorjem Fas in tako povzroči apoptozo celic, ki imajo na površini membrane receptor Fas. FasL večinoma izražajo aktivirani limfociti T in celice ubijalke. Aktivacija Fas receptorja s FasL povzroči kaspazno kaskado, ki se konča z apoptozo v občutljivih celicah. V s Fas povzročeni apoptozi je bistvena učinkovita formacija proteaznega kompleksa DISC (death-inducing signalling complex), sledi aktivacija kaspaze 8, ki direktno regulira formacijo velikih Fas receptorskih agregatov na plazemski membrani celic in povečano aktivnost DISC. Nazadnje se velik klaster Fas receptorjev endocitira in reciklira.		S Fas povzročena apoptoza je lahko regulirana z različnimi signalnimi potmi v celicah in je potrebna za normalno celično delovanje. Ena od glavnih vlog Fas receptorja je regulacija imunskega odgovora in to je najbolj očitna značilna funkcija receptorja Fas, ki ga izraža veliko različnih celic. Fas ligand (FasL) je celična membranska molekula, ki se veže z receptorjem Fas in tako povzroči apoptozo celic, ki imajo na površini membrane receptor Fas. FasL večinoma izražajo aktivirani limfociti T in celice ubijalke. Aktivacija Fas receptorja s FasL povzroči kaspazno kaskado, ki se konča z apoptozo v občutljivih celicah. V s Fas povzročeni apoptozi je bistvena učinkovita formacija proteaznega kompleksa DISC (death-inducing signalling complex), sledi aktivacija kaspaze 8, ki direktno regulira formacijo velikih Fas receptorskih agregatov na plazemski membrani celic in povečano aktivnost DISC. Nazadnje se velik klaster Fas receptorjev endocitira in reciklira.

AnaDolinar: /* Viri */

2012-04-02T22:02:09Z

Viri

← Older revision		Revision as of 22:02, 2 April 2012
Line 43:		Line 43:
	*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351		*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351
	*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992		*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992
	*S. Reich''et al.'' Small interfering RNA (siRNA) targeting VEGF effectively inhibits ocular neovascularization in a mouse model. ''Molecular vision'', 2003, letnik 9, str. 210-216		*S. Reich ''et al.'' Small interfering RNA (siRNA) targeting VEGF effectively inhibits ocular neovascularization in a mouse model. ''Molecular vision'', 2003, letnik 9, str. 210-216
	*J. Shen ''et al.'' Suppression of ocular neovascularization with siRNA targeting VEGF receptor 1. ''Gene therapy'', 2006, letnik 13, str. 225-234.		*J. Shen ''et al.'' Suppression of ocular neovascularization with siRNA targeting VEGF receptor 1. ''Gene therapy'', 2006, letnik 13, str. 225-234.

	[[Category:SEM]] [[Category:BMB]]		[[Category:SEM]] [[Category:BMB]]

AnaDolinar: /* siRNA in VEGF 1 receptor */

2012-04-02T21:52:57Z

siRNA in VEGF 1 receptor

← Older revision		Revision as of 21:52, 2 April 2012
Line 35:		Line 35:
	====<font size=+1 color=#CC0099>'''siRNA in VEGF 1 receptor'''</font><br/>====		====<font size=+1 color=#CC0099>'''siRNA in VEGF 1 receptor'''</font><br/>====
	Tudi tukaj so se najprej lotili poskusov na celicah. Uporabljena siRNA ima takšno zaporedje, da je tarčno mesto ohranjeno tako pri človeku kot tudi pri miših in podganah. Uspešnost delovanja siRNA so preverjali z luciferaznim reporterskim sistemom in dokazali učinkovitost siRNA že pri 50 pM (50x10<sup>-12</sup> M). <br/>		Tudi tukaj so se najprej lotili poskusov na celicah. Uporabljena siRNA ima takšno zaporedje, da je tarčno mesto ohranjeno tako pri človeku kot tudi pri miših in podganah. Uspešnost delovanja siRNA so preverjali z luciferaznim reporterskim sistemom in dokazali učinkovitost siRNA že pri 50 pM (50x10<sup>-12</sup> M). <br/>
	Znotraj raziskave so ugotavljali tudi porazdelitev siRNA v plasteh mrežnice. Do 24 ur po injiciranju je bila siRNA prisotna v plasti ganglijskih celic (GCL, ganglion cell layer) in v plasti notranjih jeder (INL, inner nuclear layer). Po 48 urah je bila siRNA prisotna v plasti zunanjih jeder (ONL, outer nuclear layer) ter v fotoreceptorskih celicah. Po petih dneh siRNA v očesu niso več zaznali.<br/>		Znotraj raziskave so ugotavljali tudi porazdelitev siRNA v [http://goo.gl/yMbbw plasteh mrežnice]. Do 24 ur po injiciranju je bila siRNA prisotna v plasti ganglijskih celic (GCL, ganglion cell layer) in v plasti notranjih jeder (INL, inner nuclear layer). Po 48 urah je bila siRNA prisotna v plasti zunanjih jeder (ONL, outer nuclear layer) ter v fotoreceptorskih celicah. Po petih dneh siRNA v očesu niso več zaznali.<br/>
	Tudi tukaj so uspešno znižali koncentracijo mRNA za VEGF receptor v celicah. Poudarjajo pa, da enkratno injiciranje ni dovolj in je potrebno za uspešno zdravljenje postopek večkrat ponoviti.		Tudi tukaj so uspešno znižali koncentracijo mRNA za VEGF receptor v celicah. Poudarjajo pa, da enkratno injiciranje ni dovolj in je potrebno za uspešno zdravljenje postopek večkrat ponoviti.

AnaDolinar: /* Viri */

2012-04-02T21:51:23Z

Viri

← Older revision		Revision as of 21:51, 2 April 2012
Line 43:		Line 43:
	*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351		*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351
	*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992		*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992
	*		*S. Reich''et al.'' Small interfering RNA (siRNA) targeting VEGF effectively inhibits ocular neovascularization in a mouse model. ''Molecular vision'', 2003, letnik 9, str. 210-216
			*J. Shen ''et al.'' Suppression of ocular neovascularization with siRNA targeting VEGF receptor 1. ''Gene therapy'', 2006, letnik 13, str. 225-234.

			[[Category:SEM]] [[Category:BMB]]

AnaDolinar: /* Viri */

2012-04-02T21:47:43Z

Viri

← Older revision		Revision as of 21:47, 2 April 2012
Line 43:		Line 43:
	*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351		*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351
	*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992		*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992
			*

AnaDolinar: /* Viri */

2012-04-02T21:45:35Z

Viri

← Older revision		Revision as of 21:45, 2 April 2012
Line 41:		Line 41:
	Farmacevtska družba ''Acuity Pharmaceuticals'' je na podlagi raziskav razvila zdravilo '''Bevasiranib''', ki so ga že klinično preizkusili, vendar niso dobili dovoljenja za rutinsko uporabo.		Farmacevtska družba ''Acuity Pharmaceuticals'' je na podlagi raziskav razvila zdravilo '''Bevasiranib''', ki so ga že klinično preizkusili, vendar niso dobili dovoljenja za rutinsko uporabo.
	==Viri==		==Viri==
	*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, 9, 347-351		*E. Song ''et al.'' RNA interference targeting Fas protects mice from fulminant hepatitis. ''Nature medicine'', 2003, letnik 9, str. 347-351
	*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, 15, 983-992		*T. Cotter in J. Curtun. Live and let die: regulatory mechanisms in Fas-mediated apoptosis. ''Cellular Signalling'', 2003, letnik 15, str. 983-992