RNaza A
RNaza A
RNaza A je pogosto omenjena kot najbolj raziskan encim 20. Stoletja, ni pa še popolnoma raziskana. Molekula se sintetizira v ER(endoplazmatski retikulum) trebušne slinavke, izloča pa se v črevo, kjer ima pomembno vlogo pri prebavi hrane.<ref>http://www.knjigarna-beletrina.com/knjigarna/scripta/temelji-biokemije/2510</ref> Dobimo pa jo tudi pri izolaciji plazmidne DNA kot stranski produkt.<ref>http://www.google.si/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=4&ved=0CEgQFjAD&url=http%3A%2F%2Fwww.student-info.net%2Fsis-mapa%2Fskupina_doc%2Ffkkt%2Fknjiznica_datoteke%2F1258214411_Kq6mcYD_b2_05.ppt&ei=9BLkUPSwMYiktAbm2oDwDA&usg=AFQjCNFYem0imHNGVV_gqK1U6MCCJFkV2g&bvm=bv.1355534169,d.Yms</ref>
RNaza A katalizira hidrolizo RNA in je tipa endo-b. Endonukleaze katalizirajo hidroličitno odcepljanje končnih nukleotidov to pomeni hidrolitično cepijo notranje fosfodiesterske vezi. RNaza najpogosteje cepi ob pirimidinu na 3' koncu.<ref>http://www.shop-aabiot.home.pl/en_GB/p/RNAse-10-mg/116</ref> Njena molekulska masa je 13700 Da, št. aminokislinskih ostankov pa 124.<ref>http://www.knjigarna-beletrina.com/knjigarna/scripta/temelji-biokemije/2510</ref> Sestavljena je iz ene polipeptidne verige in vsebuje 8 cisteinov.<ref>http://www.medenosrce.net/tiskaj.asp?id=140</ref> V enoverižni obliki največjo aktivnost (npr. Sintetična RNaza ima 78% aktivnost).
Nekatere oblike encima (RNaze A), ki so zelo šibko katalitično aktivne, so močno citotoksično aktivne. Ob koncu 90.let je bilo prvič pokazano, da pri človeku RNaza A postane toksična, če se veže na transferin (protein , ki prenaša železo). Nukleazna aktivnost RNaze A se zaradi vezave na transferin ne spremeni. Vezava na transferin vrjetno olajša prenos RNaze A v celico.<ref>http://www.knjigarna-beletrina.com/knjigarna/scripta/temelji-biokemije/2510</ref>
Z RNazo A je bila prvič pokazana renaturacija denaturiranih proteinov. Ker encim vsebuje 8 cisteinov, lahko tvori 4 disulfidne mostičke. Izpostavljena raztopini uree(8M) v prisotnosti reducenta 2-merkaptoetanola RNaza A denaturira. Če pa ureo odstranimo in raztopino izpostavimo kisiku, pH = 8, v prisotnosti istega reducenta, dobimo RNazo A,ki je skoraj 100 encimcko učinkovitapovrne se v nativno obliko (tvorijo se vsi 4 disulfidni mostički).<ref>http://www.medenosrce.net/tiskaj.asp?id=140</ref>
Viri
- [1][4][6] Boyer, R. Temelji biokemije. Ljubljana: Študentska založba, 2008 str. 262,263,81
- [2] Marko Dolinar,UL FKKT, 2005
- [3] RNAse A
- [5][7] Zvijanje in stabilnost proteinov